實(shí)施例2

表面張力測試：采用白金板測定菌株發(fā)酵上清液的表面張力。

將解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌劑（解淀粉芽孢桿菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1數(shù)量比混合）分別接種于LB液體培養(yǎng)基中，在28~30℃條件下振蕩培養(yǎng)發(fā)酵，直至發(fā)酵液中菌落濃度達(dá)到108～109

cfu/mL。

分別取上述各組30 mL發(fā)酵菌液，10000×g室溫離心10 min，取各組發(fā)酵上清液，利用表面張力儀測定各組發(fā)酵液的表面張力，測定3次，取平均值，測試結(jié)果如表1所示。

表面張力是洗油劑對原油洗脫能力的重要指標(biāo)，數(shù)值越低、洗脫能力越強(qiáng)。測試結(jié)果顯示解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8發(fā)酵上清液均能降低表面張力，混合菌劑發(fā)酵上清液的表面張力值更低。

實(shí)施例3

界面張力測試：在45℃下，采用TX500C界面張力儀測定菌株發(fā)酵上清液與原油間的界面張力。

將解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌劑（解淀粉芽孢桿菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1數(shù)量比混合）分別接種于LB液體培養(yǎng)基中，在28~30℃條件下振蕩培養(yǎng)發(fā)酵，直至發(fā)酵液中菌落濃度達(dá)到108～109cfu/mL。

分別取上述各組30 mL發(fā)酵菌液，10000×g室溫離心10 min，取各組發(fā)酵上清液，在45℃下，用TX500C界面張力儀進(jìn)行測定，另取同體積的LB液體培養(yǎng)基作為空白組。當(dāng)連續(xù)3次讀數(shù)之差在10-3m N/m之內(nèi)時(shí)，即可認(rèn)為測定的體系已經(jīng)達(dá)到平衡狀態(tài)，記錄最終的界面張力，測試結(jié)果如表2所示。

從表2實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可以看出與空白相比解淀粉芽孢桿菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8的界面活性好，油水界面低至1.92 mN/m和1.90mN/m，為低界面張力水平。混合菌劑的界面活性更為突出，低至0.68mN/m。

實(shí)施例4

洗油實(shí)驗(yàn)：

將原油與石英砂按照質(zhì)量比為1∶5攪拌均勻制備油砂，放入60℃烘箱中老化24 h，取出密封備用。

將解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8、混合菌劑（2組，解淀粉芽孢桿菌（Bacillusamyloliquefaciens

）ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8按1:1和3:2數(shù)量比混合）分別接種于LB液體培養(yǎng)基中，在28~30℃條件下振蕩培養(yǎng)發(fā)酵，直至發(fā)酵液中菌落濃度達(dá)到108～109cfu/mL。

分別將上述各組30 mL發(fā)酵液倒入不同的離心管中，另取同體積30 mLLB液體培養(yǎng)基作為空白組；然后各離心管分別放入上述經(jīng)過老化的15g的油砂（初始油砂含油量為2.5g），密封，均勻震蕩5次后，放入60℃烘箱靜置，24 h后取出。傾倒盡上層液體后，用20~25℃蒸餾水反復(fù)沖洗至水相無色，并收集合并沖洗液。

再將油砂烘干進(jìn)行稱量（離心管+油砂），質(zhì)量為m1，離心管的質(zhì)量為m0。

洗油效率η通過如下公式進(jìn)行計(jì)算：

η=(15-(m1-m0))/2.5

各組洗油效率測試結(jié)果如表3所示，解淀粉芽孢桿菌（Bacillusamyloliquefaciens）ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8發(fā)酵液均具有優(yōu)秀的洗油效率，本發(fā)明混合菌劑的洗油效率更為優(yōu)異，分別達(dá)到84.39%和93.32。

綜合實(shí)施例1~4的測試結(jié)果說明解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）ZZ-8均可作為生物洗油菌；本發(fā)明混合菌劑能將油從油砂表面分離開來，洗油后油砂潔凈、松散，有防止原油再粘附的作用，具有十分優(yōu)異的洗油效果。